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      ELISA檢測試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因

      更新時間:2021-07-28      瀏覽次數:1461


      仁捷生物ELISA檢測試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因,小編幫您找一下原因:
      以下幾點,請注意看哦

      問題

      序號

      可能原因

      解決方法

      顯色淡,靈敏度偏低

      1

       試劑盒未充分平衡

      試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)

      2

       樣品不適合做ELISA檢測

      樣品一般選擇培養上清、血清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優化檢測的條件(例如稀釋液的成分)

      3

       酶標板在貯存或洗后拍干時過分干燥

      防止板過于干燥

      4

       包被抗體遭到破壞

      操作溫和,移液槍不能碰到孔底

      5

       樣本和抗體孵育條件不合適

      按照說明書條件,建議孵育過程中全程振蕩孵育。

      6

       洗滌浸泡時間過長

      按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間;

      7

       偶聯HRP試劑污染

      棄去試劑,重新配置

      8

       錯誤的稀釋偶聯HRP試劑

      棄去試劑,重新配置

      9

       TMB底物孵育時間過短,因非人為因素影響,需要優化孵育時間

      確定合適的孵育時間:人為判定-最高濃度的標準品出現深藍色;S4-5有淡藍色;機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65

      10

       樣本濃度過高或存在基質效應

      建議做不同稀釋倍數,確認樣本最佳稀釋倍數。

      11

       酶標儀濾光片設置有問題或者波長選擇不對

      確認儀器設置及選擇正確的波長檢測。

      12

       酶標板不適合做ELISA

      不能使用細胞培養板,建議使用ELISA專用高吸附力板子。


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